透析是指溶質(zhì)在濃度梯度的驅(qū)使下，選擇性擴(kuò)散通過(guò)半透膜，從而達(dá)到大/小分子分離，膜兩側(cè)濃度平衡，即小顆粒的溶質(zhì)通過(guò)膜，而大分子物質(zhì)不能通過(guò)，被截留在膜另一邊。

　　如果將樣品置于透析膜管內(nèi)，通過(guò)置換膜管外部的透析緩沖液，可將小顆粒物質(zhì)清除，從而達(dá)到純化大分子物質(zhì)的目的。一般來(lái)說(shuō)，一天之內(nèi)置換3-5次緩沖液，然后在室溫條件下，放在攪拌臺(tái)上隔夜透析，即可達(dá)到高效的透析結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)的透析操作一般需要16-24小時(shí)。許多因素會(huì)影響透析效率，包括：擴(kuò)散系數(shù)、pH值、溫度、時(shí)間、物質(zhì)濃度、樣品體積、透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數(shù)、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速率。

　　透析緩沖液的體積越大，小分子擴(kuò)散的驅(qū)動(dòng)力越大。我們一般推薦緩沖液和樣品的體積比為100:1。當(dāng)擴(kuò)散速率降低，膜兩側(cè)溶液趨于平衡時(shí)，通過(guò)置換緩沖液，可維持小分子擴(kuò)散驅(qū)動(dòng)力和透析速率。我們一般推薦在12-24小時(shí)內(nèi)，置換緩沖液2到3次，具體安排如下：

　　第一次緩沖液置換：透析開(kāi)始后2-3小時(shí)

　　第二次緩沖液置換：透析開(kāi)始后4-5小時(shí)

　　最后一次緩沖液置換：透析隔夜之前

　　關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)法則？

　　表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度。如果有兩段相同長(zhǎng)度的膜管，扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積，而扁平寬度較大的膜管比表面積相對(duì)較小，也就是說(shuō)，前者的透析速率更快。原因是扁平寬度較小的膜管，溶質(zhì)的擴(kuò)散距離較短，溶質(zhì)之間通過(guò)膜孔的競(jìng)爭(zhēng)也較小。而扁平寬度大，亦即溶質(zhì)到達(dá)膜表面的距離也較長(zhǎng)，溶質(zhì)之間對(duì)膜孔的競(jìng)爭(zhēng)也較大。一般而言，比表面積越大，透析越快。